Lista wynalazków

Roztwór optycznie oczyszczający i rozszerzający tkanki, jego zastosowanie oraz sposób oczyszczania i rozszerzania tkanek

autorzy: Paweł Matryba, Jakub Gołąb, Jacek Tomczuk

Przedmiotem wynalazku jest roztwór optycznie oczyszczający i rozszerzający tkanki, zawierający imidazol, 1-(3-aminopropylo)imidazol oraz mocznik, który to roztwór służy do precyzyjnej akwizycji i segmentacji danych pochodzących z mikroskopii fluorescencyjnej, jego zastosowanie oraz sposób oczyszczania i rozszerzania tkanek z jego wykorzystaniem. Technologia dotyczy roztworu chemicznego, który poprawia jakość uzyskiwanych obrazów z wykorzystaniem mikroskopii fluorescencyjnej. Roztwór ISEE (Improved Segmentation with Benign Expansion) po nakropleniu na dowolną tkankę zwierzęcą łączy dwie unikatowe cechy: (1) doprowadza do tzw. optycznego oczyszczenia tkanki oraz (2) doprowadza do umiarkowanego i powtarzalnego rozszerzenia objętości tkanek o ~60-70% (tj. powoduje jej izometryczne wydłużenie o ~15% liniowo). Dzięki optycznemu oczyszczeniu tkanka staje się przezroczysta, w całości przewodzi światło lasera mikroskopu co pozwala na badanie grubych skrawków tkanek. Istotną zaletą roztworu ISEE jest prostota użycia (nakroplenie i odczekanie ~15 minut) i nietoksyczności. Roztwór ISEE może znaleźć zastosowanie w każdej pracowni obrazowania struktur tkankowych. Co bardzo istotne, dotychczas zweryfikowano, iż rozszerzenie tkanki z ISEE nie powoduje jej deformacji, jest to rozszerzenie izometryczne. Po zastosowaniu ISEE komórki tkanki są nie tylko świetnie widoczne i łatwe do zliczenia, analizy w sposób ilościowy, ale również posiadają swój natywny kształt i położenie względem innych elementów tkanki. Ponadto, ISEE pozostaje kompatybilne ze znakowaniem fluorescencyjnym z wykorzystaniem zarówno barwników jądrowych, jak i przeciwciał połączonych z fluorescencyjnymi znacznikami. Znaczniki te nie ulegają istotnemu wyżarzeniu przez co najmniej miesiąc, co dodatkowo podkreśla niezwykłą użyteczność ISEE, kompatybilność z obrazowaniem w każdych warunkach. Technologia roztworu ISEE zwiększa dostęp do prowadzenia badań w 3D np. poznania dynamiki powstawania przerzutów nowotworowych w kontekście całej grubości tkanki. Zastosowanie w badaniach roztworu ISEE zwiększa zarówno badane obiekty (komórki), jak i przestrzenie pomiędzy nimi co prowadzi do znakomitego poprawienia jakości wykonywanych analiz. Roztwór ISEE oferowany będzie w butelkach, w formie preparatu gotowego do bezpośredniego zastosowania. Co ważne roztwór ISEE zachowuje swoje właściwości przez okres co najmniej 6 miesięcy przechowywania w temperaturze pokojowej. Korzyści z zastosowania: • ułatwienie i zwiększenie dokładności badań 3D grubych wycinków tkanek zwierzęcych (poprzez oczyszczenie i optyczne powiększenie tkanek); • ISEE znacznie poprawia dokładność ilościowej analizy danych przeprowadzanej z najczęściej stosowanym oprogramowaniem przez biologów i bioinformatyków – ImageJ oraz Imaris; • kompatybilność z barwieniem jądrowym (jodek propidyny, Hoechst) oraz najczęściej stosowanymi związkami fluorescencyjnymi; • łatwość użycia roztworu. Rozwiązanie zostało zgłoszone do ochrony w UPRP pod numerem: P.443138